Какова последовательность этапов получения рекомбинантной плазмиды?

1. Плазмиду "разрезают" с помощью рестриктаз (ферменты, которые распознают определенные последовательности нуклеотидов и разрывают ДНК в этом месте). Эта последовательность удаляется, на на каждой из цепей образуются так называемые липкие концы.

2. Плазмиду смешивают с необходимым фрагментом ДНК, а также с ферментом лигазой, который сшивает разрезанную кольцевую и чужеродную ДНК. Вместе с необходимым геном вшивают маркерный, например, ген устойчивости к антибиотику.

3. На селективную среду (например, содержащую антибиотик) высаживают мутантные клетки. Те, в которых произошла рекомбинация, выживают, т.к. имеют ген устойчивости. Их используют в дальнейшей работе.